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興樂化工為您講解羧甲基纖維素的使用方法
來源:    發布時間: 2017-02-10 10:55   2449 次瀏覽   大小:  16px  14px  12px
興樂化工為您講解羧甲基纖維素的使用方法：

一、簡介：

CM-纖維素，它采用平均粒徑為100μm的顆粒型親水高分子聚合物，表面又用大分子糖鏈接枝，使它有更高的比表面積和更好的生物兼容性，它在高流速下保持更高載量，同時又具有更好的分辨率。由于比表面積大，平衡和洗脫的時間也更短。它經過接枝即使是純化病毒，質粒等超大分子的物質，載量基本保持不變。
本產品物理和化學穩定性好，使用壽命長，操作方便。

填料特征表
特點 載量大，分辨率好，流速高，使用方便。
基質 高度交聯纖維素
配基 一氯乙酸
配基密度 40μmol /ml
吸附載量 70mg 核酸酶
填料的顆粒大小 50-250μm
最大流速 200cm/h
pH范圍 3-10，在位清洗時pH范圍可到2-11
化學穩定性 各種緩沖液及鹽，
物理穩定性 0.1M中性緩沖液中，120℃30min 
保存溫度 4℃
 
二、應用的注意事項：
（一）、色譜柱裝填：
1、所需要用到的材料的溫度要與色譜操作的溫度一樣，液體最好做脫氣處理。填料可直接稱量需要的量用緩沖液溶漲一小時裝柱即可（建議先用適量雙蒸水浸泡12小時，再用緩沖液浸泡）。

  2、在柱子下端加入20%乙醇，以除去柱子中的空氣，關閉柱子出口，在柱內保留少量的20%乙醇。20%乙醇容易產生氣泡，可以在里面加1%吐溫避免氣泡產生。也可以換成純水裝柱子，但是需要把填料中的20%乙醇也換成純水，具體的方法取需要體積的填料在抽濾漏斗上進行，也可以小心傾去填料上的20%乙醇，再換成5倍體積的純水，反復沉淀去上清，5次左右就可以用于裝柱子.

  3、此填料顆粒比較細，所以一定要注意柱子要選擇合適的篩網，不能漏，也可以取點填料加到篩網上試試，如果沒有問題再將填料連續倒入柱子時，要用玻璃棒的緊靠柱子內壁引流，以減少氣泡的產生，讓填料先自然沉降到填料體積不再變化，而填料和上面的液體很好分層，上層溶液完全澄清，就可以開泵用適當的流速壓柱子，填料體積不再變化后，再把轉換頭緊頂在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于裝柱子的流速。

  4、在裝柱子前，填料從冰箱中取出至少要室溫放置2-3個小時，這樣避免裝柱子時由于溫度變化而使柱子中產生氣泡。

（二）、蛋白的結合：
樣品的鹽濃度和pH要盡量和平衡柱子的緩沖液一致，鹽濃度過高或者pH帶低也許掛不上，所以要根據自己的樣品做適當調整。

（三）、蛋白的洗脫：
這個填料如果采用線性梯度洗脫，柱子的直徑和高度比最好是大于10，數值越大越有利于分離，而且樣品最好別上太多，可以按約10mg/ml上樣，如果采用階段洗脫的方法，裝短粗柱子就可以，上樣量也沒有限制。階段洗脫容易放大，重復性好，如果洗脫條件好完全可以得到和線性梯度一樣或者更好。采用什么方法完全根據自己需要。

三、再生清洗：
  1．每次用完最好用0.5MNaOH含2M?NaCl洗?5個柱床體積，再用水洗5個柱床體積，然后用20%乙醇保存，使用3-5次后在水洗之后再用70%的乙醇或30%異丙醇都含1%吐溫洗5個柱床體積，最后20%的乙醇流洗5個柱床體積。

  2．有機溶劑和水混合很容易產生氣泡，為了避免這樣情況，可以把配好的有機溶劑在室溫放置過夜，再使用，這樣可以避免氣泡進柱子而導致柱子不能正常使用。

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